CIENCIAS DE LA SALUD - Artículo de Reflexión

APROXIMACIÓN DIAGNÓSTICA HISTOPATOLÓGICA A LA CARDIOMIOPATÍA CHAGÁSICA CRÓNICA EN Saguinus leucopus DENTRO DE PROGRAMAS DE REHABILITACIÓN Y REINTRODUCCIÓN

HISTOPATHOLOGICAL DIAGNOSTIC APPROACH IN Saguinus leucopus WITH CRONIC CHAGASIC CARDIOMYOPATHY IN REHABILITATION AND RE-INTRODUCTION PROGRAMS

Edward Javier Acero-Mondragón¹, María Inés Maldonado-Arango², Nohora Mercedes Angulo-Calderón³

¹ Lic. Biología, Médico Veterinario, Esp. Laboratorio Clínico. M.Sc. (c) Morfología Humana. Profesor Facultad de Medicina Universidad Militar "Nueva Granada". Grupo Morfología Médica. Dirección: Transversal 5 No 99-00. Correspondencia: edward.acero@unmilitar.edu.co

² Médico Cirujano, Esp. Educación Médica. M.Sc. (c) Morfología Humana. Profesora Asistente Facultad de Medicina Universidad de La Sabana. Grupo Proseim. Correspondencia: maria.maldonado@unisabana.edu.co

³ Médico Cirujano, Esp Anatomía Patológica. Profesora Asistente Facultad de Medicina Universidad de La Sabana. Correspondencia: nohora.angulo@unisabana.edu.co

RESUMEN

Saguinus leucopus es un primate endémico de Colombia considerado vulnerable, además, con la distribución geográfica más restringida entre Saguinus sp. Así mismo, es reconocido como reservorio natural de Trypanosoma cruzi, por compartir la distribución geográfica con vectores, como Rhodnious prolixus y Triatoma dimidiata ; sin embargo, el primate no presenta cardiomiopatía chagásica crónica de manera natural. Aproximaciones histopatológicas para diagnosticar cardiomiopatía chagásica crónica en S. leucopus, se deben establecer cuando en programas de rehabilitación y de reintroducción se hallen en los cuadros hemáticos Trypanosomas spp., paralelamente con decesos en las mismas colonias y que en las necropsias se demuestre cardiomegalias y esplenomegalias. Allí, la histopatología en corazón puede demostrar miocarditis, circunscrita al miocardio con infiltrado linfomonocitario inmunifenotipificado CD 19 negativo, pero CD3 y CD68 positivo, hallazgos que, junto a los cardiomiocitos conteniendo formas bastoniformes de 2 micras de diámetro, encerradas en una "vaina" eosinófila de grosor homogéneo, son característicos de "pseudoquistes" amastigóticos miocárdicos de cardiomiopatia chagásica, propios de los causados por la especie T. cruzi .

Palabras clave: S. leucopus , T. cruzi , cardiomiopatia chagásica.

SUMMARY

Saguinus leucopus is an endemic primate in Colombia considered vulnerable, furthermore with the most restricted geographical distribution between Saguinus spp.. It is known as a natural reservoir of Trypanosoma cruzi since it shares geographic distribution with the vectors Rhodnious prolixus and Triatoma dimidiate . However, this primate does not develop chronic chagasic cardiomyopathy in a natural way. Nevertheless, a histopathological chronic chagasic cardiomyopathy approach diagnosis should be established in S. leucopus in rehabilitation centers and for reintroduction programs, when they have been diagnosed to be infected by Trypanosoma spp. with haemograms. Simultaneously, when death occurs in the same colony and necropsy shows cardiomegaly and splenomegaly. In these cases, heart histopathology could display myocarditis with lymphomonocitary infiltration, limited to myocardium, with negative CD 19 but positive CD3 and CD68. These findings, together with the observation of cardiomyocytes containing rod-forms of 2 microns in diameter, enclosed into a "pod" with homogeneous eosinophilic thickness are characteristic of "pseudocysts", the typical amastigotes in "Chagasic cardiomyopathy" caused by T. cruzi .

Key words: S. leucopus , T. cruzi , chagasic cardiomyopathy.

INTRODUCCIÓN

Saguinus leucopus (Gunter, 1877) (Primates, Cebidae) es una especie de primate endémico de Colombia (Hernández- Camacho & Cooper et al. 1976; Defler, 2003). Su distribución geográfica es la más restringida entre los Saguinus spp. (Hernández-Camacho & Cooper, 1976; Emmons, 1997), hallándose en el norte de Colombia, entre los ríos Magdalena y Cauca (Defler, 2003). Por disminución dramática de su hábitat asociado a deforestación (Poveda & Sánchez- Palomino, 2004) es considerado como vulnerable, por la Unión Internacional para la Conservación IUCN y el apéndice I del Convention International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora CITES (CITES, 2001). S. leucopus es un primate reservorio natural Trypanosoma cruzi (Chagas, 1909) (Kinetoplastida. Trypanosomatidae) al compartir distribución geográfica con los vectores Rhodnious prolixus (Sthal, 1852) (Hemiptera, Reduviidae) y Triatoma dimidiata (Latreille, 1811) (Hemiptera, Reduviidae) (WHO 2002). Saguinus spp. como otros primates pequeños del nuevo mundo siendo reservorios, no presentan cardiomiopatía chagásica de manera natural (Teixeira et al. 2006), aunque sí han sido logradas en infecciones experimentalmente, en fase aguda, para otros primates neotropicales, como Cebus apella (Linnaeus, 1758) (Primates, Cebidae) (Teixeira et al. 2006; Almeida et al. 1992; Rosner et al. 1988) y, en fase crónica, después de un año de la infección en C. apella , Callitrix penicilata (É. Geoffrey, 1812) (Primates, Callitrichidae) y Saimiri sciureus (Linneo 1758) (Primates, Cebidae) (Teixeira et al. 2006). Sobre Saguinus spp. en cautividad, la literatura reporta aproximaciones diagnósticas a las cardiomegalias por cardiomiopatía dilatada que llevan a falla cardiaca de forma espontánea, describiéndose histopatológicamente fibrosis cardiacas mínimas (David et al. 2009), similar a las logradas experimentalmente en colonias cautivas de Saguinus spp., infectadas con virus de la Hepatitis GB (Chamanza et al. 2006); sin embargo, las caracterizaciones anatomopatológicas de cardiomiopatía con cardiomegalia asociada a enfermedad de Chagas, con borramiento del ápice del ventrículo izquierdo, típico del hallazgo anatomopatológico de la cardiomiopatía chagásica crónica en humanos, solo se ha descrito en un tercio de los primates del nuevo mundo, cuando son infectados experimentalmente (Teixeira et al. 2006); en S. leucopus cautivos no hay antecedentes histopatológicos dirigidos a la búsqueda de cardiomiopatía chagásica crónica, cuando se encuentran cardiomegalias en las necropsias; por consideraciones epidemiológicas de la enfermedad de Chagas, el objetivo de este articulo es plantear una aproximación histopatológica al diagnóstico de cardiomiopatías chagásicas crónicas en las cardiomegalias halladas en las necropsias de las especies de S. leucopus , en programas de rehabilitación y de reintroducción

MATERIALES Y MÉTODOS

En los programas de rehabilitación y de reintroducción de S. leucopus , los animales fallecidos en colonias de esta especie, cuando se les practique necropsia y en ella se encuentre organomegalia cardiaca y esplénica, se les deben extraer estos órganos, fijándolos con formol al 10%. En un laboratorio de Patología, se deben hacer cortes transversales del ápice cardiaco y del diámetro esplénico mayor, submuestreando segmentos de corazón y del bazo, con tamaños de 0,5cm3, para procesamiento histotécnico y cortes en parafina a 3 micras; los cortes obtenidos, se deben colorear con histoquímica de Hematoxilina y de Eosina; las láminas histológicas obtenidas, se deben observar con microscopio óptico de luz en objetivo de 5X y 10X, buscando en corazón, pérdida de la arquitectura de las fibras miocárdicas con fibrosis y en endomisio infiltrados linfomonocitarios circunscritos (Arboleda & Quintana, 2007; Barrera et al. 2008); paralelamente, se debe buscar cardiomiocitos conteniendo múltiples formas bastoniformes de color basófilo, las cuales, a objetivo de 40X y 100X con micrómetro, se deben apreciar con diámetro aproximado de 2 micras (Teixeira et al. 2006; Almeida et al. 1992; Rosner et al. 1988). Por técnicas inmunohistoquímicas, el infiltrado linfomonocitario miocárdico, se debe inmunofenotipificar buscando clusters de diferenciación CD3, CD19 y CD68 (Barrera et al. 2008; Arboleda & Quintana, 2007; Camargos et al. 2000). En los cortes de bazo coloreados con Hematoxilina y con Eosina y observados con objetivos de 5X y 10X, entre tanto, se buscan folículos linfoides y vainas linfáticas periarteriales con focos reactivos, en zona marginal e infiltrada, principalmente, por macrófagos (O'Daly et al. 1984).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

En Colombia, los programas de rehabilitación y de reintroducción practican cuadros hemáticos en S. leucopus cautivos y se han hallado hemoparasitosis por Microfilaria spp. (Ladino & Moreno, 2007; Fox et al. 2008); así mismo, en Saguinus spp. silvestres, se ha demostrado Trypanosoma spp. (Hershkovitz, 1977). Particularmente en las hemoparasitosis por Trypanosomas spp. es difícil reconocer la especie T. cruzi, porque si bien los trypomastigotes sanguíneos se pueden distinguir morfométricamente de la especie T. minasense (Ziccardi & Olivera, 1999) son mas difíciles de diferenciarse entre T. rangeli y T. cruzi (De Sousa, 1999) y solo T cruzi causa miocardiopatia chasgásica (Maudlin et al. 2004), por tanto, el hallazgo de estos hemoparásitos por cuadro hemático en los procesos de rehabilitación de S. leucopus , no indican iniciar conductas terapéuticas para eliminarlos (De Sousa, 1999; Maudlin et al. 2004); mas aún, si desde el punto de vista epidemiológico en Colombia se hiciere por hemograma un diagnóstico Trypanosoma spp. en S. leucopus de centros de rehabilitación con altitudes como 2600 msnm (como en Bogotá-Colombia), también se hace inoficioso iniciar conducta terapéutica con fines de evitar iniciación de ciclos epidemiológicos, porque no existe en estas latitudes descritos vectores Rhodnious sp. y Triatoma sp., para Trypanosoma spp. (WHO, 2002).

Ahora, si en Colombia centros de rehabilitación con programas de reintroducción para S. leucopus se ubican por debajo de 1800 msnm y se hallan Trypanosomas spp. en cuadros hemáticos y es acompañado este reporte con muertes de colonias de estos primates, se deben practicar necropsias en busca de organomegalias en corazón y en bazo, iniciando, con estos hallazgos, el abordaje diagnóstico de cardiomiopatía chagásica crónca, la cual, está reportada de forma natural en mamíferos del hemisferio occidental, asociadas únicamente a la especie de T. cruzi (Teixeira et al. 2006; WHO 2002) y que por su habilidad de hacer fases amastigotas intracelulares en miocardio causando miocarditis chagásica, lo diferencia de T. rangeli (D'alessandro, 1974) o T. minasense (Ruivo et al. 2005).

La aproximación diagnóstica histopatológica a la cardiomiopatía chagásica crónica en S. leucopus dentro de programas de rehabilitación y de reintroducción, inicia con la demostración histopatológica en miocardio de focos circunscritos de infiltrado linfomonocitario compatibles con miocarditis (Foto 1a), alternándose con cardiomiocitos entre hipertróficos y normotróficos (Rosner et al. 1988; Camargos et al. 2000); en algunos cortes histológicos, se puede alternativamente observar múltiples formas bastoniformes de 2 micras de tamaño, aproximadamente, en cuyo interior sobresale una estructura basófila redondeada o puntiforme; todas las formas bastoniformes descritas, a su vez encerradas en una "vaina" eosinófila de grosor homogéneo, son compatibles con lo que se conoce como "pseudoquistes" amastigóticos de T. cruzi (Foto 1b) (Teixeira et al. 2006; Almeida et al. 1992; Rosner et al. 1988) y han sido observados y descritos por infección experimental de T. cruzi en C. apella (Teixeira et al. 2006; Almeida et al. 1992; Rosner et al. 1988), roedores (Camargos et al. 2000; Barrera et al. 2008) y en infecciones naturales crónicas en humanos (Arboleda & Quintana, 2007). Todos estos hallazgos en miocardio, se deben acompañar histopatológicamente en el bazo esplenomegálico con folículos linfoides y vainas linfáticas periarteriales reactivas con focos en zona marginal nodular linfóidea, infiltrada, principalmente, por macrófagos (O'Daly et al. 1984) (Foto 1c).

Con respecto a la inmunohistoquímica que fenotipifíca el infiltrado linfomonocitario de la miocarditis es asociada a enfermedad chagásica crónica, cuando marca positivo CD3, para Linfocitos T (Parodi et al. 2009) (Foto 2a), negativa para Linfocitos B CD19 (O'Daly et al. 1984) (Foto 2b) y positiva para Macrófagos CD68 (Santander et al. 2007) (Foto 2c); combinación inmunohistoquímica demostrada en infecciones crónicas experimentales de T cruzi en ratas (Camargos et al. 2000), en ratones (Barrera et al. 2008) y en aves (Teixeira et al. 2011) e infecciones crónicas naturales en humanos (Arboleda & Quintana, 2007).

Dado que T. cruzi , T. rangeli y T minasense están descritos en Saguinus spp. colombianos (Hershkovitz, 1977), los procesos de rehabilitación deben involucrar esfuerzos para confirmarlos taxonómicamente más allá del Género, ya que en Colombia no hay datos epidemiológicos de prevalencia de estos hemoparásitos, en Saguinus spp.

Un estudio panameño reporta para S. geoffroyi prevalencias de 1,3% para T. cruzi ; 52,7%, para T. minasense y 25% para T. rangeli (Sousa et al. 1974; Sousa & Dawson, 1976); estos datos, se podrían compartir en Colombia, porque las áreas de distribución geográfica de S. geoffry (Emmons, 1997) están dentro de la misma área de distribución de los vectores de triatomidos R. prolixus y T. dimidiata , en el norte de Suramérica (WHO, 2002). Mas aun, si se hallan cardiomagalias asociadas a cardiomiopatía chagásica en S. leucopus, se pueden relacionar en nuestro medio el tropismo asociado a clones de T. cruzi tipo I o de ciclo selvático (Botero et al. 2007), que está demostrado, incluso, puede iniciar brotes chagásicos por vía de transmisión oral (Benchimol, 2006; Coura, 2006). Estudios epidemiológicos demuestran que T. cruzi tipo I o de ciclo selvático tienen distribución geográfica al norte de Suramérica, por arriba de la cuenca del amazonas (Miles et al. 2003) y que predominan en Colombia (Duque et al. 2011), coincidiendo en este territorio con las áreas distribución de S. leucopus (Defler, 2003; Emmons, 1997). En el contexto de salud pública, estudios de relación entre cardiomiopatía chagásica crónica en S. leucopus dentro de programas de rehabilitación y de reintroducción y la prevalencia de T. cruzi tipo I en la zona de distribución de S. leucopus , no han sido establecidos, considerando la dramática disminución de su hábitat (Poveda & Sánchez- Palomino, 2004), con programas de reintroducción para esta especie de primate (Leal et al. 2010; Ruivo et al. 2005) presionados por ser el Cébido de más alto tráfico en la ciudad de Bogotá, Colombia (Ruiz-García et al. 2010); preguntas como ¿cuáles son los riesgos de introducir S. leucopus sin diagnóstico de tripanosomiasis en poblaciones silvestres de S. leucopus y qué riesgos tiene la población humana en las zonas de reintroducción dentro de la dinámica reservorio vulnerable-vector? Se deben empezar a resolver.

Conflicto de intereses: Declaramos que el manuscrito fue preparado y revisado por los autores y no tienen ningún conflicto de intereses que ponga en riesgo la validez de los resultados presentados. Financiación: El estudio histopatológico e inmunohistoquímico de este trabajo fue financiado con recursos propios de los autores

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Recibido: Julio 25 de 2011 Aceptado: Marzo 25 de 2012